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產(chǎn)品展示

Plasmid Focurose HPR

價(jià) 格:詢價(jià)

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國(guó)

貨 號(hào):HQ200220001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

   為確保產(chǎn)品的性能和無(wú)憂的操作,使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè),有任何疑問(wèn)請(qǐng)咨詢本公司售后技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員(聯(lián)系方式見附錄)。

 

1.產(chǎn)品介紹

Plasmid Focurose HPR純化原理是利用配基的嗜硫吸附,適用于分離純化閉環(huán)的超螺旋質(zhì)粒DNA。

特點(diǎn):

a.快速、簡(jiǎn)單(一步純化)。

b.載量高、流速快、易于放大。

表1:介質(zhì)性能參數(shù)

基質(zhì)

高剛性瓊脂糖

粒徑范圍

25-45um

平均粒徑

35±5um

結(jié)合載量1

≥2mg(pDNA)/ml(介質(zhì))

pH穩(wěn)定性

3-11(長(zhǎng)期)

2-13(短期)

化學(xué)穩(wěn)定性

所有常用緩沖溶液中穩(wěn)定

30%異丙醇、70%乙醇、1M醋酸、0.5M NaOH

流速

≥150cm/h

操作壓力

≤0.5MPa

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-8℃

 

2.溶液制備

平衡液:2.1M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。

洗脫液:0.3M NaCl、1.7M (NH4)2SO4、10mM EDTA、100mM Tris-HCl, pH 7.5。

 

3.樣品制備

3.1樣品是經(jīng)過(guò)Focurose FF初步純化的收集組分。

3.2樣品過(guò)濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過(guò)濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過(guò)濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過(guò)濾)。

 

4.純化流程(以XK16/10為例)

4.1采用液滴對(duì)液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

4.2用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

4.3用平衡液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

4.4將樣品以4ml/min的流速上樣。

4.5用平衡液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

4.6用洗脫液以2.5ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

4.7用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

4.8用保存液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

 

5.清洗(以XK16/10為例)

5.1用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.2用0.5M NaOH以1ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.3用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗10個(gè)CV。

5.4用平衡液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.5用純化水以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

5.6用保存液以4ml/min的流速?zèng)_洗5個(gè)CV。

 

6.常見問(wèn)題

表2:常見問(wèn)題及解決方案

問(wèn)題

可能原因

解決方案

純化時(shí)目標(biāo)物不與介質(zhì)結(jié)合

或結(jié)合量較低

1.上樣量過(guò)載

降低上樣量

2.上樣流速過(guò)快

降低上樣流速

3.目標(biāo)物和介質(zhì)結(jié)合力弱

增加平衡液中(NH4)2SO4濃度

洗脫時(shí)沒(méi)有收集到目標(biāo)物

或只收集到少量目標(biāo)物

1.目標(biāo)物沒(méi)有與介質(zhì)結(jié)合或結(jié)合量較少

先確認(rèn)目標(biāo)物是否與介質(zhì)結(jié)合

2.洗脫時(shí)間不夠

降低流速,延長(zhǎng)洗脫液的保留時(shí)間

3.洗脫體積過(guò)小

加大洗脫體積

目標(biāo)物純度較低

 

1.樣品沒(méi)有經(jīng)過(guò)前處理

上柱前必須要經(jīng)過(guò)過(guò)濾

2.樣品粘度過(guò)高

用平衡液適當(dāng)?shù)南♂寴悠?,降低樣品粘度和濃度?/span>

3.洗雜不徹底

加大洗雜體積直至基線平穩(wěn)并與平衡液一致

4.雜質(zhì)蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集沉淀

及時(shí)有效地清洗介質(zhì)

5.柱料裝填效果不佳

重新裝填或購(gòu)買

6.分離柱頂部有較大儲(chǔ)樣體積

重新裝柱或降低儲(chǔ)樣體積

7.介質(zhì)中有微生物生長(zhǎng)

介質(zhì)使用完后,請(qǐng)及時(shí)正確保存介質(zhì)

介質(zhì)載量下降

1.上樣流速過(guò)快

降低上樣流速

2.蛋白或脂類在介質(zhì)中聚集,導(dǎo)致載量下降

及時(shí)清洗介質(zhì)

3.使用次數(shù)過(guò)多,配基逐漸脫落

更換新介質(zhì)

色譜峰上升過(guò)陡

介質(zhì)裝填過(guò)緊

重新裝柱

色譜峰上升過(guò)緩或拖尾

介質(zhì)裝填太松

重新裝柱

柱床有裂縫或干涸

出現(xiàn)泄露或大體積氣泡引入

檢查管路是否有泄露或氣泡,重新裝柱

液流較慢

1.蛋白或脂類聚集

及時(shí)清洗介質(zhì)或?yàn)V膜

2.分離柱中微生物生長(zhǎng)

所用試劑必須經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣;

樣品上柱前必須離心或過(guò)濾

 

7.訂購(gòu)信息

表3:訂購(gòu)信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號(hào)

Plasmid Focurose HPR

25ml

HQ2002200025M

Plasmid Focurose HPR

100ml

HQ200220100M

Plasmid Focurose HPR

500ml

HQ200220500M

Plasmid Focurose HPR

1L

HQ200220001L

Plasmid Focurose HPR

5L

HQ200220005L

Plasmid Focurose HPR

20L

HQ200220020L

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Plasmid Focurose HPR

Plasmid Focurose HPR

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Plasmid Focurose HPR

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