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ANX Focurose 4FF

價(jià) 格：詢價(jià)

規(guī) 格：25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地：中國

貨號(hào)：HL030308001L

品牌：匯研生物

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產(chǎn)品概述

為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本手冊(cè)，有任何疑問請(qǐng)咨詢本公司技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員。

ANX Focurose 4FF適用于分離純化蛋白、多肽、核酸等所有帶電的生物分子。

1 產(chǎn)品介紹

特點(diǎn)：

a.快流速，提高產(chǎn)能。

b.中等顆粒，良好分辯率。

c.兼容性好，適合各種規(guī)模生物分子的初期捕獲或中度純化。

d.純化工藝靈活性高，可以和疏水層析組合使用。

表1：ANX Focurose 4FF 性能參數(shù)

介質(zhì)	ANX Focurose 4FF
基質(zhì)	高度交聯(lián)4%的瓊脂糖
粒徑范圍	45-165μm
平均粒徑	90±5μm
介質(zhì)類型	弱陰離子交換
帶電基團(tuán)	-N+(C2H5)2H
離子載量	130-180umol Cl-/ml 介質(zhì)
pH穩(wěn)定性	3-10（長期） 2-14（短期）
操作壓力	≤0.3MPa
流速	≧250cm/h
化學(xué)穩(wěn)定性	所有常用緩沖液、1.0M氫氧化鈉、8.0M尿素、6.0M鹽酸胍、70%乙醇避免使用氧化劑、陰離子去污劑、陰離子緩沖液
貯存溶液	20%乙醇
貯存溫度	4-30℃

2 選擇指導(dǎo)

2.1 離子交換介質(zhì)的選擇

圖1：離子交換介質(zhì)的選擇

說明：

a.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí)，選擇陽離子交換介質(zhì)。

b.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí)，選擇陰離子交換介質(zhì)。

c.所使用溶液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍以內(nèi)。

2.2 緩沖溶液的選擇

表2：陰離子交換緩沖液

pH范圍	緩沖鹽	濃度（mM）	平衡離子	pKa(25℃)
4.3-5.3	N-Methylpiperazine	20	Cl-	4.75
4.8-5.8	Piperazine	20	Cl-或HCOO-	5.33
5.5-6.5	L-Histidine	20	Cl-	6.04
6.0-7.0	bis-Tris	20	Cl-	6.48
6.2-7.2	bis-Tris propane	20	Cl-	6.65
7.3-8.3	Triethanolamine	20	Cl-或CH3COO-	7.76
7.6-8.6	Tris	20	Cl-	8.07
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	20	SO42-	8.52
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	50	Cl-或CH3COO-	8.52
8.4-9.4	Diethanolamine	50	Cl-	8.88
8.4-9.4	Propane 1,3-Diamino	20	Cl-	8.88
8.6-9.6	bis-Tris propane	20	Cl-	9.10
9.0-10.0	Ethanolamine	20	Cl-	9.50
9.2-10.2	Piperazine	20	Cl-	9.73
10.0-11.0	Propane 1,3-Diamino	20	Cl-	10.55
10.6-11.6	Piperidine	20	Cl-	11.12

表3：陽離子交換緩沖液

pH范圍	緩沖鹽	濃度（mM）	平衡離子	pKa(25℃)
1.4-2.4	Maleic acid	20	Na+	1.92
2.6-3.6	Methyl malonic acid	20	Na+或Li+	3.07
2.6-3.6	Citric acid	20	Na+	3.13
3.3-4.3	Lactic acid	50	Na+	3.86
3.3-4.3	Formic acid	50	Na+或Li+	3.75
3.7-4.7	Succinic acid	50	Na+	4.21
4.3-5.3	Acetic acid	50	Na+或Li+	4.75
5.1-6.1	Succinic acid	50	Na+	5.64
5.2-6.2	Methyl malonic acid	50	Na+或Li+	5.76
5.6-6.6	MES	50	Na+或Li+	6.27
6.7-7.7	Phosphate	50	Na+	7.20
7.0-8.0	HEPES	50	Na+或Li+	7.56
7.8-8.8	BICINE	50	Na+	8.33

說明：

a.按照表2和表3選擇緩沖溶液的種類和濃度。

b.錯(cuò)誤的緩沖液（種類和濃度）會(huì)干擾分離效果(如分離度、載量、pH波動(dòng)等)。

c.所使用緩沖液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍內(nèi)。

d.使用分析純或者更高純度的緩沖液。

e.在溶液配制后，須經(jīng)過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用0.8μm過濾）和脫氣處理（超聲或負(fù)壓）。

3 樣品的制備

樣品所在溶液要和平衡液保持一致，可以用平衡液稀釋或透析/超濾/G25進(jìn)行緩沖液置換。

樣品過濾（平均粒徑<45μm，用0.22μm過濾；45μm<平均粒徑<165μm，用0.45μm過濾；平均粒徑>165μm，用 0.8μm過濾）。

4 純化流程（以XK16/10為例）

采用液滴對(duì)液滴（避免引入氣泡）的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV（CV指柱床體積，下同）。

用洗脫液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

將樣品以5ml/min的流速上樣。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

用洗脫液以5ml/min洗脫5CV或20CV(根據(jù)前期篩選實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

用再生液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

備注：再生液=平衡液+1M NaCl，其它組分不變。

5 放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注：若實(shí)際情況和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)有偏差，可以維持停留時(shí)間不變。

6 維護(hù)

6.1平衡

柱子裝填完成后，用平衡液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.2再生

每次分離純化后，用再生液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生沒有清洗干凈的物質(zhì)，例如脂類、沉淀物、變性蛋白。

a.強(qiáng)離子結(jié)合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向沖洗5CV。

b.沉淀物、疏水結(jié)合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

c.脂類、強(qiáng)疏水蛋白。

用1.0M NaOH，30%異丙醇以30cm/h的流速反向沖洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

6.5滅菌

將介質(zhì)置換到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中進(jìn)行高壓滅菌。

6.6保存

介質(zhì)在20%乙醇中4-30℃保存。

7 訂購信息

表4：訂購信息表

產(chǎn)品	規(guī)格	貨號(hào)
ANX Focurose 4FF	25ml	HL030308025M
ANX Focurose 4FF	100ml	HL030308100M
ANX Focurose 4FF	500ml	HL030308500M
ANX Focurose 4FF	1L	HL030308001L
ANX Focurose 4FF	5L	HL030308005L
ANX Focurose 4FF	20L	HL030308020L